آمفولیت ها برای تشکیل یک گرادیان pH در داخل مویرگاستفاده می شوند، و پروتئین هایی که باید جدا شوند از طریق محیط آمفولیت مهاجرت می کنند (یا متمرکز می شوند) تا زمانی که در pI خود بدون بار شوند. مقادیر.
چرا آمفولیت ها در IEF استفاده می شوند؟
در IEF، آمفولیت های بر اساس بارشان تحت تأثیر میدان الکتریکی ، در حضور گرادیان pH حرکت می کنند تا زمانی که بار خالص مولکول صفر شود (به عنوان مثال، نقطه ایزوالکتریک، pI). حتی سادهترین آمفولیتها (به عنوان مثال، اسیدهای آمینه) میتوانند یک گرادیان pH ایجاد کنند و به عنوان یک بافر ایزوالکتریک عمل کنند.
چرا نقطه ایزوالکتریک مهم است؟
نقطه ایزوالکتریک در خالص سازی پروتئین مهم است زیرا نشان دهنده PH است که در آن حلالیت معمولاً حداقل است. … این پلیمر دارای خواص منحصر به فردی است تا اطمینان حاصل کند که پروتئین ها هنگام اعمال میدان الکتریکی در سراسر محلول، یک گرادیان pH تشکیل می دهند.
آمفولیت ها چگونه گرادیان pH ایجاد می کنند؟
در CIEF، یک گرادیان pH ناهمگن در داخل مویرگ با اعمال ولتاژ در سراسر آمفولیتهای حامل ایجاد میشود. آمفولیت ها به صورت تجاری برای پوشش دادن محدوده های pH گسترده و باریک موجود هستند، همانطور که در شکل 5.2 نشان داده شده است.
شیمی آمفولیت چیست؟
آمفولیت ها ترکیباتی هستند که وقتی در آب حل می شوند (که خود یک ترکیب آمفوتریک است) می توانند به عنوان اسید یا باز عمل کنند.