بهترین راه برای جدا کردن کلروپلاست ها از بافر چیست؟

2024 نویسنده: Fiona Howard | [email protected]. آخرین اصلاح شده: 2024-01-10 06:36

برای اینکه بتوان رنگدانه ها را استخراج کرد، کلروپلاست ها در یک بافر جداسازی معلق می شوند. برای اینکه بتوانیم رنگدانه ها را از کلروپلاست ها استخراج کنیم، ابتدا باید از شر بافر خلاص شویم. بهترین راه برای جداسازی کلروپلاست ها از بافر چیست؟ از یک سانتریفیوژ برای جدا کردناستفاده کنید

چگونه کلروپلاست را جدا می کنید؟

در روش جداسازی کلروپلاست، دیواره سلولی به صورت مکانیکی با استفاده از مخلوط کن یا هموژنایزرشکسته می شود. سپس بافت نشکن برگ و بقایای سلولی با فیلتراسیون حذف می شوند. کلروپلاست ها با سانتریفیوژ با استفاده از گرادیان پرکول جمع آوری می شوند.

چگونه یک بافر جداسازی کلروپلاست درست می کنید؟

مقدار مورد نیاز بافر جداسازی کلروپلاست 1X را با رقیق کردن بافر 2X به نسبت 1:1 با آب dH2O آماده کنید به ازای هر میلی لیتر از کلروپلاست 1X 10 میکرولیتر از محلول BSA 10% اضافه کنید. بافر جداسازی درست قبل از استفاده، 1 میکرولیتر DTT به ازای هر 1 میلی لیتر بافر جداسازی کلروپلاست اضافه کنید. این بافر را به عنوان «بافر کامل» برچسب بزنید.

در بافر جداسازی کلروپلاست چیست؟

بافر جداسازی DNA

شامل 100 میلی‌مولار NaCl، 100 میلی‌مولار Tris-HCl (pH 8.0)، 50 میلی‌مولار EDTA، و 1 میلی‌مولار DTT بود. گلوله کلروپلاست با 8 میلی لیتر بافر جداسازی DNA، 1.5 میلی لیتر 20% SDS، 20 میکرولیتر 2- مرکاپتواتانول و 30 میکرولیتر پروتئیناز K (10 میلی گرم بر میلی لیتر) در یک لوله سانتریفیوژ در دمای 55 درجه سانتی گراد به مدت 4 ساعت.

pH بافر مورد استفاده برای همگن کردن برگ اسفناج در پروتکل جداسازی کلروپلاست چقدر است؟

اسفناج سرشار از کلروپلاست های خوبی است و به راحتی جدا می شوند. باید برگها را در مخلوط کن سرد با بافر فسفات 0.1 مولار، pH 7.5 و 0.5M ساکارز قرار دهید تا از ترکیدن آنها جلوگیری کنید.